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间与实验测验的时刻距离,实验坚持的时刻,一起给出满足的机动时刻(如实验记载,药物替换等),必要时让别的的人打针对照剂或实验药品(盲法实验);
5、在给药后15,30及60min时,即测验尾闪反响,将动物放到尾闪测验板并把其尾部放到光源
小孔上,即开端计时,调查动物尾部逃避反响的时刻,或直到停止(cut-off)时刻。留意一次实验只测1个时刻点,而不是3个时刻点;
6、将动物放到尾闪测验仪上到反响出现时的潜伏期或停止实验时刻记载下来,在一切实验动物完结测验后(一般每组至少8个数据),分组将其均匀并作统计学评价。
尾闪实验时,也常用到一种称为最大或许效应百分比(percent max.mum possible effect,MPE,%),即:MPE(%)=[(给药后一根底反响),(停止时刻一根底反响)] x 100
2、有必要坚持一切的实验程Байду номын сангаас共同,尽量轻盈抓取动物,让动物有满足的时刻习惯实验者的气味及实验室环境,否则可形成实验成果的显着动摇或不能重复。
3、影响光源的强弱,即影响的强度太高或太弱均可使实验成果改变较大,并且高强度的影响或许掩盖实验药物的作用,因此,用药前的根底测验十分重要。
4、为削减实验的差错,一般适量约束动物的活动,如用毛巾裹住动物或把它们放入小筒中,这两种办法把握不妥都可形成动物的压抑( stress)行为而影响实验成果。
尾闪实验( tail-flick test)也叫鼠尾光照测痛实验,是一种用热作影响的急性损伤性感觉痛苦的实验,即用热影响动物(鼠类)的尾巴,当其尾部遭到损伤性影响时会发生十分显着的逃避反响,这是一种脊髓的委曲反射。该痛苦模型最早由DAmour和Smith在1941年描绘,它可测验轻度麻醉的动物并且不受动物运动协调性的影响,因此比热板实验具有必定的优越性,可是尾闪实验的尾巴温度或许会影响实验成果,易引起假阳性或假阴性,实验终究的行为反响也较为杂乱(如舔这以后爪)。Janssen等(1963)依据尾闪实验用温水(49度)代替热光源来影响动物的尾巴测验其反响时刻,更新的实验设备则可用较限制的热门影响,专门影响菜一个单一的脚爪,然后测定其反响潜伏期,这比热板实验影响的4个悉数的脚爪或尾闪实验影响的尾部更为精密。
1、从动物房取出实验动物,称重后,让动物在实验室习惯30min,将对照组与实验组分隔;
2、药物预备对照组(生理盐水等)及给药组(如等,核算药物浓度,如大鼠按2mg,kg绐
3、测定动物的根底反响潜伏期( baseline latencies) 用尾闪实验测验仪(即在一小孔的平板下有一个发热光源,将大鼠(尾尖部前50mm左右)或小鼠(尾尖部前约15mm)的尾部放在小孔的上方,发动发热光源开端计时,直到尾巴逃避停止,调整光源的强度,设大多数鼠的尾部躲闪时刻在3- 4s,假如没有逃避反射则把实验停止时刻设定为1Os,避免烧伤;
2.实验药物生理盐水(对照)与镇痛药物(如,lOmg/kg,皮下打针)。
这儿根底反响与给药后均指反响潜伏期,一切动物在测验前,应该先测定一下它的反响潜伏期
(根底反响反响潜伏期);给药后反响潜伏期是指动物承受药物(包含对照用生理盐水或其他载体)打针(或灌注)后实验中的反响潜伏期;停止时刻是指给药后动物不能对热作出反响而停止实验的时刻(1Os)。
1、假如给药前或对照组动物测不到反响或反响潜伏期很接近实验停止时刻,阐明影响强度太弱(光源温度设定较低),有必要加大影响强度。